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从土壤或湖海沉积物中提取的DNA都含有棕黑色或黑色的腐殖酸的污染，而腐殖酸对PCR等后续反应有极大的抑制作用，本制品专门用于从土壤DNA样品中清除腐殖酸污染。

• 去污染效果好，能使腐殖酸的浓度降低10倍以上。
  
• DNA回收率高，一般都在80%以上。
  
• 操作过程简单快速，只需要10分钟。
  
• 扩容性好，可小规模操作，也可以大规模操作。
  
• 处理后的样品原液或稍微稀释后即可用于PCR。

• 将0.3mL专用上柱液与50μL或50μL以下的含腐殖酸的DNA溶液轻柔混匀。如果DNA溶液体积超过50μL，专用上柱液的体积需按1:6 (DNA溶液:专用上柱液)的比例相应增加。不要剧烈震荡，否则DNA容易断裂。
  
• 将离心管中的溶液转移到离心吸附柱中，套上收集管，放于离心管架上，静置3～5分钟，12000～15000g离心1分钟并倒掉收集管中的液体。若一次加不完，可分两次加入并离心。
  
• 加入0.5mL通用洗柱液于离心柱中，12000～15000g离心1分钟，倒弃收集管中的废液。
  
• 重复3步操作1次。
  
• 12000～15000g离心1分钟以去除离心柱中的残留液体。
  将离心柱置于一新的干净的离心管中，加入50μL TE(pH8.0)溶液，静置3～5分钟，12000～15000g离心1分钟。离心管底部所得溶液即为纯化的DNA溶液，可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。

• 如何判断提取的DNA没有腐殖酸污染？
  方法一是目测法，即看得到的溶液是否无色。如果呈淡棕黑色或淡黄色，说明可能是少量残留的未除尽的腐殖酸。
  方法二是检测最大光吸收。
  注意：有腐殖酸污染并不表示DNA不能使用，有的腐殖酸并不抑制PCR扩增。
  
• 腐殖酸的最大吸收波长是多少？
  腐殖酸(humic acid)是一大类呈棕黑色或黑色的物质，其结构千差万别，土壤中腐殖酸的组成和特点随土壤不同而不同，所以其最大吸收波长也各不相同。有的土壤的腐殖酸的最大吸收波长在260nm，有的则在340nm，所以用特定的波长测定OD值时波长的选定要根据土壤而决定。Sigma,Fluka等公司出售的腐殖酸产品成分一般比较简单，其最大吸收波长不能推广到成分更为复杂的土壤腐殖酸样品。
  
• 是否腐殖酸都会抑制后续的DNA反应？
  否，因为腐殖酸是一大类物质的统称，他们的结构和特性各不相同，所以是否对后续反应有影响最好通过实验来验证。
  如果用提取的DNA溶液原液进行反应而反应没发生，而对照样品(已知的不含污染的DNA)能够发生，说明可能有抑制作用。
  
• 在用土壤DNA进行细菌专一性PCR时，为何没加DNA模版的阴性对照有扩增产物出现？
  这是由于使用的Taq DNA聚合酶一般从E.coli表达菌株中提取，提取过程中污染了E.coli的基因组DNA，而使用的广谱细菌专一性引物可以识别所有细菌DNA基因组DNA模版，所以会产生扩增。建议使用高质量的TaqDNA聚合酶。